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                    技術支持
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                    尼康生物顯微鏡使用與保養

                    發表時間:2020-07-24  |  點擊率:830
                      一、尼康生物顯微鏡的使用
                     
                      (一)使用環境與習慣
                     
                      1、使用環境
                     
                      顯微鏡的工作場所應當清潔、干燥、無震動、無腐蝕性氣體存在。
                     
                      2、工作習慣
                     
                      (1)臺面和凳子的高度要適當。
                     
                      (2)鏡檢時,即便用單目顯微鏡,也須兩眼同時睜開,用左眼觀察。以便右眼繪圖或記錄。如一只眼睜,一只眼閉,眼睛容易疲勞,無法久看。工作時間較長時,可兩眼輪流觀察。
                     
                      (二)尼康生物顯微鏡使用前的準備
                     
                      1、光學系統的安裝
                     
                      對新購或已經卸掉光學系統的顯微鏡,使用前必須先將顯微鏡安裝起來。安裝時,為了防止向下掉灰塵,應按照先上后下的順序,即按照目鏡、物鏡、聚光鏡、反射鏡的順序來安裝。
                     
                      安裝物鏡時,應先將鏡筒升高或載波物臺下降,使轉換器與載物臺之間保持一定的距離。然后,握往物鏡,把它放入轉換器的螺絲口處,先略向反時針方向旋轉,待物鏡配上絲紋后,再按順時針方向旋入,旋中等程度松緊即可。安裝物鏡時,應根據物鏡的放大倍數,從小到大順時針安裝。轉換物鏡時,不要用手推著物鏡旋轉,那樣會使物鏡的光軸歪斜。好用手捏著轉換器的轉動盤旋轉,或用手扶著與物鏡轉換器銜接處的滾花外圓旋轉。
                     
                      目鏡和物鏡裝好后,再將聚光鏡插入載物臺下面的聚光器支架內。插入的高度應使聚光器升高時,聚光鏡上透鏡的端面稍低于載物臺的平面,以免載玻片與聚光器的鏡頭相碰。然后,將聚光器的固定螺絲旋緊。對非電光源的顯微鏡來說,后要把反射鏡插入聚光器下面的插孔內。
                     
                      2、校正光軸
                     
                      校正光軸的意義在于使物鏡、目鏡、聚光鏡的主光軸和可變光欄的中心點重合在一條直線上。所以又叫做合軸調節或中心調節。如果光軸歪斜,會使像差增大,分辨率和清晰度都要下降。
                     
                      檢查方法是將可變光欄開大,把低倍物鏡旋入光軸,降低鏡筒,使物鏡與載物臺之間的距離小于該物鏡的工作距離(5mm以下)。不放標本,調節反射鏡的角度,使視場亮;或調節光源燈的亮度,使視場明暗合適。
                     
                      然后,拔掉目鏡,直接從鏡筒中觀察。一邊把可變光欄慢慢縮小或打開數次,當光欄關小時,光欄的像(此時只有一點點)應正好落在物鏡通光孔的中心。當光欄開大到一定程度時,光欄孔的像應正好與物鏡通光孔的黑圈相重合。若符合上述兩個條件,說明它們“合軸”。否則,就需要調整。
                     
                      目鏡和物鏡都是固定的,無法進行調整。合軸調節主要是調整聚光鏡的位置。有些顯微鏡聚光器支架兩旁有兩個光軸校正螺絲,調節這兩個螺絲,即可合軸。另一種聚光器是由框架上三個相隔120°的螺絲支持住,其中一個裝有彈簧,可以伸縮;另外兩個螺絲,可以旋動。調整這兩個螺絲,便可合軸。
                     
                      顯微鏡的光軸校正好后,如果沒有拆下聚光器或其它特殊原因,不必經常校正。
                     
                      3、準備好標本
                     
                      準備好高質量的標本備用。
                     
                      (三)尼康生物顯微鏡反射鏡、聚光器的使用方法和對光方法
                     
                      1、調光
                     
                      對采用反射鏡的的顯微鏡,一般都使用平面反射鏡去反射太陽的散射光。只有在光線不足或窗外有干擾時,才使用凹面反射鏡。
                     
                      采用電光源的顯微鏡,將光亮調合適即行。
                     
                      2、聚光器的用法
                     
                      (1)聚光器高度的調節 一般的聚光鏡,在平行光照射的情況下,其焦點落在它上端透鏡平面中心上方約1.25mm處。當使用高倍鏡或油鏡時,由于放大率大,鏡像亮度小,需要較強的照明。因此,應把聚光器升高,以便使聚光鏡的焦點正好落在標本平面上。但在使用低倍物鏡時,可將聚光器適當下降。
                     
                      (2)可變光欄的用法 可變光欄起兩個作用。一是控制射向標本的光通量;二是改變聚光器的數值孔徑。在這兩個作用中,后者是主要的。為了使物鏡的分辨率得到充分的利用,從原則上說,聚光器的數值孔徑應與物鏡的相同。否則,分辨率或清晰度會受影響。
                     
                      3、對光方法
                     
                      對電光源顯微鏡來說,使用時,只要將光調節在合適的亮度即行。不需要進行對光。但對使用自然光的低檔顯微鏡來說,要想獲得良好的觀察效果,必須充分利用照明光線。因此,鏡檢之前應先對光。對光時,將低倍鏡旋入光軸,聚光器適當升高,可變光欄開大。然后,從目鏡中觀察,同時轉動反射鏡,直視場明亮、清晰為止。如果利用自然光,則盡量躲避窗框和窗外樹枝的干擾。
                     
                      (四)物鏡的正確調焦
                     
                      對光完成后或調節合適光亮后,升高鏡筒或降低載物臺,將標本玻片夾在移動器即標本夾上,并將欲檢查的部分移載物臺通光孔的中央,然后開始調焦。
                     
                      無論作何種檢查,均應從低倍鏡開始。調焦時,先用粗動手輪將鏡筒下降,使低倍鏡的前透鏡與蓋玻片之間的距離略小于該物鏡的工作距離(5mm以下)。為了避免物鏡壓在標本玻片上,可從側面窺視。然后,一邊從目鏡中觀察視野,一邊利用粗動手輪將鏡筒徐徐上升,待初見物像后,改用微動手輪作精細調焦,直物像清晰為。低倍物鏡的視場大,有利于觀察標本的全貌。也可利用移動器或縱、橫向調節手輪尋覓所觀察的目標。如有必要,可將尋得的目標移視場的中心,為高倍鏡觀察作好準備。
                     
                      從低倍物鏡轉換為高倍物鏡時,如果物鏡是顯微鏡的原配,所用的載玻片、蓋玻片又符合標準,一般都可以進行“等高轉換”。即轉換后,只要稍微調節一下微調旋鈕,即可看到清晰的圖像。但油鏡不強求齊焦,好先將鏡筒升高后再轉換,后按低倍鏡的調焦方法重新調焦。
                     
                      使用油鏡的方法如下:先將鏡筒升高,取下標本玻片,稍稍降低聚光器,并在聚光器的鏡頭上滴兩滴香柏油(油中不應有氣泡。如有,可用小木簽除去),再將標本玻片放回原處,把聚光器升高,使載玻片的底面與香柏油接觸。這樣,就完成了聚光鏡的油浸。接著,在蓋玻片上滴上1滴香柏油。然后從側面窺視,利用粗調使鏡筒盡量下降,直油鏡的前透鏡浸沒在香柏油中(但尚未接觸玻片),這樣,又完成了物鏡的油浸。然后,一邊從目鏡中觀察,一邊利用微動手輪將鏡筒緩緩上升(注意不要擰錯了方向,壓碎蓋玻片),直視野中出現清晰的物像為止。
                     
                      聚光鏡的油浸,還可以采用另一種滴油方法:即不直接把油滴在聚光器的鏡頭上,而是把載玻片翻過來,將油滴在載玻片的底面上,然后再翻過去,對準放置于聚光器上面,再使聚光器上升,來完成聚光器的油浸。這種方法雖然不那么順手,但比較安全。有些人使用玻璃棒直接與聚光鏡接觸來涂抹香柏油,這種方法容易劃傷鏡片,不宜采用。
                     
                      在使用油鏡時,允許在聚光鏡與標本之間不加香柏油,即聚光鏡上仍以空氣為介質,但這會犧牲物鏡的分辨率。
                     
                      如用油鏡觀察后,如又需要轉回高倍物鏡觀察,應將蓋玻片上的油擦去,以免沾污高倍物鏡。但聚光器上的油可以不擦,只要把光欄適當縮小一點即可。
                     
                      油鏡使用完畢后,要及時將香柏油擦拭干凈。鏡頭上可先用干凈的擦鏡紙擦1——2次,把大部分的油擦掉。然后用二甲苯滴濕的擦鏡紙擦兩次,后用擦鏡紙擦干凈即行。聚光鏡的擦拭方法與此相同。如標本需要保存,玻片上的香柏油可用“拉紙法”擦拭干凈。即將擦鏡紙復蓋在玻片上,在紙上滴上一滴二甲苯,趁濕將紙條平拖著往外拉,連續幾次即可擦干凈。
                     
                      后指出:在整個調焦過程中(尤其是高倍物鏡和油鏡的調焦),每個動作都要緩慢進行。否則,物像會一閃而過,找不到觀察的目標。
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